Water SARS-CoV-2 RT-PCR Test

Águas residuais não tratadasque não foram tratados quimicamente.

O teste de água SARS-CoV-2 RT-PCR é um teste de transcrição reversa quantitativa seguida por reação em cadeia da polimerase (RT-qPCR) que detecta e quantifica RNA viral em uma amostra de águas residuais devidamente preparada.

Quando utilizado com o protocolo de concentração de 105 ml, a menor concentração de SARS-CoV-2 em águas residuais que pode ser detectada pelo teste de água SARS-CoV-2 RT-PCR é de aproximadamente 1 cópia de gene/1 ml.

Quando utilizado com o procedimento completo da IDEXX, o teste IDEXX foi validado para oferecer recuperação altamente consistente de SARS-CoV-2 em águas residuais.

O protocolo validado pela IDEXX concentra o vírus SARS-CoV-2 a partir de 105 ml de águas residuais. A equipe do laboratório pode analisar volumes de água maiores ou menores realizando o procedimento básico dimensionado para diferentes volumes com os devidos equipamentos de centrifugação.

O Water SARS-CoV-2 RT-PCR Test analisa 5 µl do RNA extraído preparado a partir de uma amostra de concentrado de águas residuais, mas recomendamos ter um volume adicional à mão para uso em caso de perdas na pipeta e amostras em duplicatas.

A IDEXX disponibiliza um exemplo de protocolo de concentração baseado na centrifugação e precipitação com polietilenoglicol (PEG) que foi validado e oferece resultados consistentes. Este protocolo pode ser modificado para atender exigências laboratoriais específicas. Outros métodos de concentração também podem ser utilizados, como ultrafiltração e filtrações múltiplas. Os clientes têm obtido sucesso ao usar estes métodos de concentração com os reagentes da IDEXX. É necessária validação para verificar o desempenho.

A manutenção de uma temperatura fria ajuda a evitar a degradação da amostra e a garantir a precipitação eficaz do vírus SARS-CoV-2.

O teste de água SARS-CoV-2 RT-PCR foi validado para uso com o IDEXX Water DNA/RNA Magnetic Bead Kit para extrair ácidos nucleicos, inclusive RNA do SARS-CoV-2, a partir de um concentrado de águas residuais. Outros kits de extração podem ser utilizados com o teste e os clientes têm obtido sucesso ao usar outros kits com os reagentes para RT-qPCR da IDEXX.

Águas residuais são uma matriz extremamente complexa e seu monitoramento exige um controle abrangente dos materiais. Consulte o relatório Complete IDEXX Wastewater Surveillance Protocol e veja uma descrição completa de todo o procedimento e controles obrigatórios e recomendados.

Consulte nos folhetos dos produtos as condições de armazenamento recomendadas no momento do recebimento do produto e após a reconstituição/primeiro uso.

O Centro de Controle e Prevenção de Doenças (CDC) dos EUA indica um nível de biossegurança 2 (BSL-2) com precauções adicionais no laboratório para a testagem de amostras ambientais, incluindo o manuseio e o processamento de amostras de águas residuais associadas ao SARS-CoV-2. Para obter orientações específicas do CDC dos EUA, consulte: Normas interinas de biossegurança laboratorial para o manuseio e o processamento de amostras associadas à doença pelo coronavírus 2019 (COVID-19) .⁴

Consulte a autoridade sanitária local para obter recomendações específicas.

Siga os procedimentos recomendados pelas autoridades sanitárias locais para o manuseio e processamento de amostras de águas residuais associadas ao SARS-CoV-2. Uma fonte de informação é publicada pelo CDC dos EUA: Normas interinas de biossegurança laboratorial para o manuseio e o processamento de amostras associadas à doença pelo coronavírus 2019 (COVID-19) .⁴

Siga todas as diretrizes regulamentadoras e de segurança locais. 

Pode-se usar um tratamento térmico opcional para inativar as amostras por meio da pasteurização, se desejado. Veja um exemplo no folheto do produto. 

A etapa da pasteurização pode reduzir a detecção do RNA do SARS-CoV-2. Entre em contato com um representante da IDEXX para obter mais informações.

Descarte todas as amostras e materiais segundo as diretrizes regulamentadoras locais.

O teste de água SARS-CoV-2 RT-PCR não foi aprovado pela EPA dos EUA para a detecção do SARS-CoV-2 em águas residuais. A EPA dos EUA não regulamente atualmente a testagem de SARS-CoV-2 em águas residuais nem aprova métodos de testagem para esse fim. A testagem de SARS-CoV-2 em águas residuais pode ou não ser regulamentada pelas suas autoridades locais e/ou governamentais. Consulte os regulamentos que podem aplicar-se em sua área.

Sim, o teste de água SARS-CoV-2 RT-PCR é compatível ou inclui todos os controles e processos recomendados pelo CDC para envio de dados ao NWSS. Consulte o relatório Complete IDEXX Wastewater Surveillance Protocol e veja uma descrição completa de todo o procedimento, que inclui todos os controles obrigatórios e recomendadas.